Cromatografía de interacción hidrofóbica (HIC)
El bioprocesamiento actual requiere operaciones más precisas y eficientes. La cromatografía de interacción hidrofóbica (HIC) separa moléculas en función de las diferencias en su hidrofobicidad superficial. Esta tecnología se usa ampliamente en la purificación cromatográfica, especialmente como un paso de purificación más preciso de otros métodos como el intercambio iónico (IEX) o la afinidad. La HIC normalmente requiere una alta concentración de sal para una unión eficaz de la proteína diana. Por lo tanto, se usa idealmente después de las etapas cromatográficas en las que la elución se logra con altas concentraciones de sal, es decir, cromatografía de intercambio iónico.
Sartorius tiene una gama de modalidades de HIC (resinas, membranas y monolitos) para adaptarse a su aplicación.
Potente método para eliminar agregados
Ideal después de la limpieza inicial de la muestra y la cromatografía IEX
Ideal para pasos finales de pulido o purificación intermedia de moléculas grandes
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HIC se utiliza principalmente para la remoción de agregados debido a su desempeño superior en esa función.
Las resinas exhiben buenas capacidades de unión para proteínas de tamaño pequeño y mediano, mientras que las resinas de modo mixto a menudo combinan mecanismos HIC e IEX.
Las membranas tienen una mayor capacidad de unión a virus, partículas similares a virus y otros complejos grandes en comparación con las resinas, y también ofrecen la ventaja de velocidades de flujo más altas que dan como resultado un tiempo de proceso más corto y una mayor productividad.
Los monolitos HIC son clave para separar las isoformas del ADN plasmídico.
Aplicación | Captura de biomoléculas grandes, pulido de todas las biomoléculas | Captura y pulido de biomoléculas grandes. |
Implementación | Multiuso, de Single-Use entre lotes | Multiuso, de Single-Use entre lotes |
Facilidad de uso | Listo para usar | Listo para usar |
Escalabilidad | Cápsulas y casetes para escalado lineal | Amplia gama de tamaños de dispositivos |
Sartobind® Phenyl – Fácil eliminación de agregados
Sartobind® Phenyl es una membrana de interacción hidrofóbica con baja sustitución de ligandos. Esto permite condiciones de elución suaves para la purificación de todas las biomoléculas.
Las membranas Sartobind® Phenyl se pueden considerar como un reemplazo de las columnas para operaciones de pulido (flujo continuo) y una serie de aplicaciones de unión y elución, ya que funcionan a velocidades de flujo mucho más altas, complejidad reducida y sin efectos de exclusión de tamaño al purificar grandes biomoléculas.
La capacidad de enlace dinámica (DBC) típica con un avance del 10% es:
• 9-13 mg / ml de mAb
• 10 mg / ml de BSA
• 23 mg / ml de lisozima
La elección para la cromatografía de interacción hidrofóbica (HIC)
La cromatografía de interacción hidrofóbica (HIC) es imprescindible para las separaciones de ácidos nucleicos. Cuando se combina con las ventajas de la cromatografía monolítica, HIC satisface esta necesidad al mismo tiempo que proporciona una excelente solución para la purificación de grandes biomoléculas, incluidos los virus adenoasociados (AAV).
Tamaños de canal | 1.3, 2, 6 µm | 2, 6 µm |
Volumen de columna | 1 mL – 8 L | 1 mL – 8 L |
Rango de trabajo, pH | 2 – 10 | 2 – 10 |
Funcionalidad | Hidrofóbico débil | Fuerte hidrofóbico |
| Aplicación tipica | Virus, (i.e. AAV), and VLPs | Ácidos nucleicos (pDNA, mRNA) |
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CIMmultus® OH – Cromatografía de interacción hidrofóbica
Ligando no cargado (neutro)
Rango de trabajo, pH 2–10
Retiene solutos muy grandes (partículas de virus, VLP, vesículas) en presencia de sales precipitantes o polietilenglicol
Eluye solutos grandes con alta resolución en orden de tamaño creciente
Elución con sal descendente o polietilenglicol
Desinfectable con NaOH 1 M
CIMmultus® C4-HLD - Cromatografía de interacción hidrofóbica
Ligando fuertemente hidrofóbico (sin carga)
Rango de trabajo, pH 2–10
Muy eficaz para eliminar proteínas de ácidos nucleicos (pDNA, RNA)
