hydrophobic interaction chromatography molecules

Cuando los nuevos desafíos de purificación requieren un enfoque preciso

Cromatografía de interacción hidrofóbica (HIC)

El bioprocesamiento actual requiere operaciones más precisas y eficientes. La cromatografía de interacción hidrofóbica (HIC) separa moléculas en función de las diferencias en su hidrofobicidad superficial. Esta tecnología se usa ampliamente en la purificación cromatográfica, especialmente como un paso de purificación más preciso de otros métodos como el intercambio iónico (IEX) o la afinidad. La HIC normalmente requiere una alta concentración de sal para una unión eficaz de la proteína diana. Por lo tanto, se usa idealmente después de las etapas cromatográficas en las que la elución se logra con altas concentraciones de sal, es decir, cromatografía de intercambio iónico.

Sartorius tiene una gama de modalidades de HIC (resinas, membranas y monolitos) para adaptarse a su aplicación.

Consulte a nuestros expertos

Eliminación de agregados

Potente método para eliminar agregados


Purificación complementaria

Ideal después de la limpieza inicial de la muestra y la cromatografía IEX


Pulido eficiente de biomoléculas

Ideal para pasos finales de pulido o purificación intermedia de moléculas grandes


Encuentre la solución adecuada para su proceso de cromatografía de interacción hidrofóbica

HIC se utiliza principalmente para la remoción de agregados debido a su desempeño superior en esa función.

Las resinas exhiben buenas capacidades de unión para proteínas de tamaño pequeño y mediano, mientras que las resinas de modo mixto a menudo combinan mecanismos HIC e IEX.

Las membranas tienen una mayor capacidad de unión a virus, partículas similares a virus y otros complejos grandes en comparación con las resinas, y también ofrecen la ventaja de velocidades de flujo más altas que dan como resultado un tiempo de proceso más corto y una mayor productividad.

Los monolitos HIC son clave para separar las isoformas del ADN plasmídico.


Membranas

Monolitos

Aplicación
 

Captura de biomoléculas grandes, pulido de todas las biomoléculas

Captura y pulido de biomoléculas grandes.

Implementación 

Multiuso, de Single-Use entre lotes

Multiuso, de Single-Use entre lotes

Facilidad de uso

Listo para usar

Listo para usar

Escalabilidad

Cápsulas y casetes para escalado lineal

Amplia gama de tamaños de dispositivos

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Membranas Sartobind® en HIC

Sartobind® Phenyl – Fácil eliminación de agregados

Sartobind® Phenyl es una membrana de interacción hidrofóbica con baja sustitución de ligandos. Esto permite condiciones de elución suaves para la purificación de todas las biomoléculas.

Las membranas Sartobind® Phenyl se pueden considerar como un reemplazo de las columnas para operaciones de pulido (flujo continuo) y una serie de aplicaciones de unión y elución, ya que funcionan a velocidades de flujo mucho más altas, complejidad reducida y sin efectos de exclusión de tamaño al purificar grandes biomoléculas.

La capacidad de enlace dinámica (DBC) típica con un avance del 10% es:
• 9-13 mg / ml de mAb
• 10 mg / ml de BSA
• 23 mg / ml de lisozima


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Monolitos para HIC

La elección para la cromatografía de interacción hidrofóbica (HIC)

La cromatografía de interacción hidrofóbica (HIC) es imprescindible para las separaciones de ácidos nucleicos. Cuando se combina con las ventajas de la cromatografía monolítica, HIC satisface esta necesidad al mismo tiempo que proporciona una excelente solución para la purificación de grandes biomoléculas, incluidos los virus adenoasociados (AAV).


CIMmultus® OH

CIMmultus® C4-HLD

Tamaños de canal

1.3, 2, 6 µm

2, 6 µm

Volumen de columna

1 mL – 8 L

1 mL – 8 L

Rango de trabajo, pH

2 – 10

2 – 10

Funcionalidad

Hidrofóbico débil

Fuerte hidrofóbico

Aplicación tipica

Virus, (i.e. AAV), and VLPs 

Ácidos nucleicos (pDNA, mRNA) 

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CIMmultus® OH – Cromatografía de interacción hidrofóbica

  • Ligando no cargado (neutro)

  • Rango de trabajo, pH 2–10

  • Retiene solutos muy grandes (partículas de virus, VLP, vesículas) en presencia de sales precipitantes o polietilenglicol

  • Eluye solutos grandes con alta resolución en orden de tamaño creciente

  • Elución con sal descendente o polietilenglicol

  • Desinfectable con NaOH 1 M

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CIMmultus® C4-HLD - Cromatografía de interacción hidrofóbica

  • Ligando fuertemente hidrofóbico (sin carga)

  • Rango de trabajo, pH 2–10

  • Muy eficaz para eliminar proteínas de ácidos nucleicos (pDNA, RNA)

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