Ensaios de ligação e baseados em células
A terapêutica baseada em proteínas requer uma caracterização completa usando bioensaios e ligações baseados em células, bem como ensaios estruturais e físico-químicos.
A Sartorius desenvolveu ensaios econômicos, prontos para uso e personalizáveis para avaliar uma ampla variedade de proteínas, como anticorpos monoclonais, proteínas de fusão e biespecíficos. Oferecemos uma gama completa de ensaios de caracterização Fc para avaliar a ligação e a função da região Fc, bem como imunoensaios para as medições quantitativas de substâncias ativas ou biomarcadores, ou para detectar impurezas.
Oferecemos aos desenvolvedores de produtos biológicos um conjunto de ensaios prontos para uso e serviços de teste totalmente compatíveis com GCP, GLP e GMP que facilitam e aceleram o desenvolvimento de produtos biológicos.
Nossa ampla gama inclui ADCC com vários tipos de efetores, ADCP e CDC. Utilizamos várias plataformas analíticas e temos experiência em ensaios de falta de função.
Nossos ensaios prontos para execução para classes de moléculas padrão economizam tempo e dinheiro para começar do zero. Para ensaios mais complexos, nossas plataformas são projetadas para fornecer um trampolim para o desenvolvimento analítico.
A capacidade total de cGMP em nossos sites globais, juntamente com nossa experiência no desenvolvimento de ensaios robustos, nos permite mover seus ensaios selecionados da caracterização para a qualificação e validação de liberação de lote com facilidade.
A Sartorius oferece um conjunto completo de ensaios para caracterizar drogas de anticorpos ao longo de todo o processo de desenvolvimento. Isso torna possível ligar as propriedades estruturais e físico-químicas de uma proteína com sua função biológica, facilitando a tomada de decisão.
Encontre o seu bioensaio
# | Bioensaio baseado em células | Ensaio de ligação | Caracterização da Função Fc | Caracterização de ligação Fc |
---|---|---|---|---|
1 | Ensaios de potência personalizados | Cinética de ligação por SPR | Total PBMC ADCC | Ligação de C1q por ELISA e SPR |
2 | Ensaios de células imunológicas | Ensaios personalizados ELISA | ADCC enriquecido com linfóide | Ligação ao receptor Fc-gama por SPR |
3 | Ensaios ADCC | Ensaios de ligação baseados em células | Célula NK ADCC | Ligação de FcRn por SPR |
4 | ADCP ensaios | Ensaio de repórter ADCC | ||
5 | CDC ensaios | ADCP & CDC |
Serviços bioanalíticos prontos para regulamentação
A Sartorius oferece serviços de desenvolvimento para ensaios de potência padrão e personalizados. Os ensaios de prateleira podem ser otimizados para atender às necessidades de um desenvolvedor de drogas, ou os ensaios podem ser personalizados e desenvolvidos para resultados otimizados. Ensaios totalmente qualificados ou validados podem ser transferidos para nossos clientes para testes e monitoramento de rotina.
Nossos ensaios de potência são projetados e realizados de acordo com todos os requisitos regulamentares aplicáveis, incluindo USP1033, Farmacopeia Europeia e ICH Q2B.
Também oferecemos o desenvolvimento de ensaios para apoiar estudos de comparabilidade e realizar avaliações de mudanças de processo, incluindo:
- Desenvolvimento de ensaio personalizado para medir a neutralização
- Ensaios de proliferação celular e morte celular (apoptose)
- Ensaios de liberação de citocinas
- Ensaios que medem a modulação da sinalização celular (eventos de fosforilação)
- Ensaios que medem a modulação da resposta inflamatória (função / recrutamento das células imunológicas)
- .Ensaios de ligação ao receptor e ativação do receptor
- Ensaios de ligação de ligante Ensaios de fluxo de cálcio
A imunoncologia surgiu como um dos tratamentos mais promissores para o câncer. Para apoiar o número crescente de empresas que desenvolvem drogas imuno-oncológicas, a Sartorius desenvolveu um conjunto de ensaios que nos permite caracterizar as interações das células imunológicas durante o processo de desenvolvimento. Realizamos os seguintes ensaios como serviços:
- Ativação
- Proliferação
- Produção de citocinas
- Regulação / supressão
- .Morte celular / apoptose
- ADCC
- ACDP
A Sartorius emprega o iQue Screener PLUS para reduzir o tempo e a quantidade de amostra necessária, obtendo múltiplas leituras fenotípicas e funcionais em um único ensaio. Nossa equipe de especialistas trabalha para otimizar seu processo e interpretar dados críticos com precisão. Também projetamos e desenvolvemos ensaios personalizados para atender às necessidades específicas de cada biofabricante.
A citotoxicidade mediada por células dependente de anticorpos (ADCC) é um importante mecanismo de ação dos anticorpos terapêuticos, especialmente em oncologia. A determinação da atividade ADCC é, portanto, uma etapa crítica no desenvolvimento de drogas de anticorpos, para caracterizar como modo de ação primário ou secundário ou, no caso de algumas terapêuticas, para demonstrar sua ausência.
Soluções de Ensaios Biológicos Customizáveis
A Sartorius desenvolveu uma gama de plataformas de ensaio ADCC robustas que abordam os problemas de variabilidade bem conhecidos desses ensaios usando formatos baseados em placas ou iQue Screener PLUS. Dependendo das necessidades e requisitos do desenvolvedor da droga, os ensaios Sartorius ADCC podem ser realizados usando células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), que são colhidas no dia do ensaio de uma variedade de doadores genotipados. Nosso portfólio de ensaios ADCC também inclui ensaios ADCC substitutos que utilizam linhas celulares projetadas que expressam de forma estável o receptor FcγRIIIa para negar a variabilidade específica do doador e fornecer soluções viáveis para validação desses ensaios complexos.
Usando nossa metodologia de plataforma, podemos desenvolver um ensaio ADCC para atender às suas necessidades. ADCC personalizado, juntamente com nossos ensaios ADCC qualificados para alvos comuns, podem ser ajustados para atender às suas necessidades de mudança ao longo do processo de desenvolvimento com uma gama de efetores:
- PBMCs totais
- PBMC Enriquecido com Linfoide
- Células assassinas naturais (NK)
- Promega ADCC Reporter Cells
- Células Efetoras KILR CD16
Uma variedade de ensaios de ligação ao receptor Fc e análise aprofundada de glicano também estão disponíveis para complementar o ADCC funcional.
A Fagocitose Celular Dependente de Anticorpo (ADCP) é um mecanismo imunológico através do qual células-alvo ligadas a anticorpos que expressam tumor ou antígenos derivados de patógenos em sua superfície ativam FcγRs (predominantemente FcγRIIa) na superfície de monócitos e macrófagos para induzir a fagocitose. O ADCP resulta na internalização e degradação da célula-alvo por meio da acidificação do fagossoma e, com isso, a eliminação do corpo.
Soluções de ensaio ADCP robustas e personalizáveis
Na Sartorius, oferecemos ADCP usando o iQue screener PLUS. Este método mede a fagocitose mediada pela ativação de FcgRI, IIa e IIIa usando PBMCs com potencial para multiplexar dados.
Podemos personalizar ainda mais as leituras ADCC simultâneas para coletar informações sobre outras populações de células e citocinas para investigar completamente a resposta funcional do seu anticorpo.
Um bioensaio repórter baseado em placa para medir ADCP, permitindo potencial para validação também está disponível.
Consulte nossos especialistas
A citotoxicidade dependente do complemento (CDC) é uma função efetora bem caracterizada dos anticorpos IgG e IgM. O CDC é iniciado pela ligação da proteína do complemento C1q ao domínio Fc dos mAbs, o que desencadeia uma cascata proteolítica e resulta na formação do complexo de ataque à membrana e subsequente morte da célula alvo por lise.
A capacidade de um anticorpo terapêutico para ativar o complemento e realizar o CDC precisa ser avaliada durante a caracterização do produto.
Plataforma robusta para medir o CDC
A Sartorius oferece uma plataforma robusta que permite aos desenvolvedores qualificar e medir a atividade do CDC para uma variedade de alvos. Desenvolvemos soluções prontas para uso que estão prontas para uso e também oferecem desenvolvimento totalmente personalizado para novos alvos. Tanto o complemento de coelho quanto o humano podem ser adquiridos para o desenvolvimento e teste do ensaio CDC.
Para antígenos que são difíceis de expressar de forma solúvel, os ensaios de ligação baseados em células permitem a medição da interação de ligação ao antígeno nativo. E porque os ensaios de ligação são um componente chave da caracterização da molécula, particularmente para terapias baseadas em anticorpos, a Sartorius desenvolveu uma variedade de metodologias para avaliar a ligação baseada em células usando diferentes tecnologias, incluindo:
- Citometria de fluxo com iQue Screener PLUS
- Recursos de descoberta de meso escala (MSD)
Suporte ao desenvolvimento de ensaio baseado em células
Nossa equipe científica especializada pode trabalhar com você para desenvolver um ensaio para avaliar a ligação ao seu alvo de escolha usando qualquer uma das tecnologias. Também podemos oferecer suporte a ensaios no MSD que podem ser validados para GMP para uso na liberação do lote. E nossa gama de ensaios usa uma variedade de linhas celulares para avaliar a ligação a alvos comuns, como CD20, HER2, tmTNFa, bem como métodos para avaliar o fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) associado às células.