Ensaios de ligação

A caracterização molecular é uma parte crítica do desenvolvimento de terapias baseadas em proteínas. A Sartorius desenvolveu um conjunto de ensaios de ligação robustos para fornecer informações detalhadas sobre as interações biológicas do seu produto.

Nossos ensaios de ligação customizáveis, econômicos e prontos para uso contribuem para a caracterização abrangente de seu produto. Aplicamos uma variedade de tecnologias de ponta para garantir que tenhamos uma plataforma que atenda às suas necessidades, incluindo ressonância de plasmon de superfície (SPR), imunoensaios ligados a enzima (ELISA), eletroquimioluminescência (ECL) e descoberta de mesoescala (MSD). Também oferecemos uma gama completa de ensaios de caracterização de Fc para avaliar o potencial de seu biológico para induzir uma resposta imune.

A Sartorius oferece um conjunto completo de soluções de caracterização de produtos: nossos ensaios de ligação são complementados por nossos ensaios estruturais e físico-químicos e bioensaios baseados em células. Nossos serviços de teste são totalmente compatíveis com GCP, GLP e GMP, facilitando e acelerando o desenvolvimento biofarmacêutico.

Experiência da função Fc

A Sartorius fornece uma variedade de ensaios para caracterizar a região Fc de anticorpos monoclonais. Para os isotipos mais comuns de anticorpos monoclonais terapêuticos, oferecemos ensaios pré-desenvolvidos e pré-qualificados para analisar a ligação de Fc a FcγR e C1q

Esses ensaios de ligação são suportados por nossa gama de bioensaios para citotoxicidade celular dependente de anticorpos (ADCC), fagocitose celular dependente de anticorpos (ADCP) e citotoxicidade dependente de complemento (CDC)

Ensaios e plataformas prontos para uso

Nossos ensaios prontos para execução para classes de moléculas padrão economizam tempo e dinheiro para começar do zero. Para ensaios mais complexos, nossas plataformas são projetadas para fornecer um trampolim para o desenvolvimento analítico

Liberação de lote

A capacidade total de cGMP em nossos sites globais, juntamente com nossa experiência no desenvolvimento de ensaios robustos, nos permite mover seus ensaios selecionados da caracterização para a qualificação e validação de liberação de lote com facilidade

Caracterização de fonte única

A Sartorius oferece um conjunto completo de ensaios para caracterizar drogas de anticorpos ao longo de todo o processo de desenvolvimento. Isso torna possível ligar as propriedades estruturais e físico-químicas de uma proteína com sua função biológica, facilitando a tomada de decisões

Encontre o seu ensaio de ligação
Ensaio de ligaçãoCaracterização de ligação Fc
Cinética de ligação por SPRLigação de C1q por ELISA e SPR
Ensaios personalizados ELISALigação ao receptor Fc-gama por SPR

Ensaios de ligação baseados em células

Ligação de FcRn por SPR

O domínio Fc de anticorpos medeia funções imunológicas e pode desempenhar um papel no mecanismo de ação de um anticorpo terapêutico ou de um ADC terapêutico. Por causa disso, a caracterização de Fc é exigida tanto pelo FDA quanto pelas diretrizes da EMA para envios de IND e BLA.

Na Sartorius, desenvolvemos ensaios para agilizar a caracterização de Fc.

Ensaios de caracterização Fc prontos para uso

A Sartorius oferece ensaios totalmente desenvolvidos e pré-qualificados para a análise da ligação de Fc a FcγR e C1q para mAbs. Esses ensaios são projetados para testes de fase inicial e estão prontos para serem usados ​​para caracterização Fc rápida, eficiente e econômica.

Uma seleção dos ensaios que oferecemos disponíveis no mercado são:

  • Ligação de IgGs a FcγR por SPR (painel completo)
  • Ligação de IgGs a FcRn por SPR (humano, rato, camundongo ou macaco cynomolgus)
  • C1q ligação a IgG por SPR
  • Ligação de C1q a lgG por ELISA

Serviços de Caracterização Fc

Quando as soluções prontas para uso não são suficientes, a equipe da Sartorius pode desenvolver uma solução personalizada que atenda aos requisitos exclusivos do produto de um cliente.

Ensaios de ligação C1q

O sistema complemento é parte do sistema imunológico que aumenta a capacidade dos anticorpos e células fagocíticas de eliminar patógenos e células cancerosas do corpo. Consiste em pequenas proteínas que circulam no sangue, geralmente como precursores inativos. C1q é um componente do sistema complemento que se liga e ativa os complexos antígeno-anticorpo.

Os ensaios de ligação C1q medem a ativação do complexo C1 usando ressonância plasmônica de superfície (SPR) e / ou ensaios ELISA.

Ensaios e serviços C1q

A Sartorius oferece ensaios de ligação C1q para apoiar a fabricação e desenvolvimento de processos de proteína de fusão mAb e Fc, bem como estudos de caracterização e similaridade. Usamos ensaios de ligação C1q que foram qualificados com mAbs terapêuticos comercialmente disponíveis para demonstrar o desempenho e trabalhamos em estreita colaboração com nossos clientes para qualificá-los especificamente para o seu produto.

Nossos ensaios C1q incluem:

  • Ensaios de ligação de C1q altamente sensível utilizando SPR capaz de detectar diferenças na glicosilação
  • Um ensaio ELISA de ligação a C1q

Ambos os métodos podem ser usados ​​para demonstrar a ligação ou a falta dela para todos os isotipos de mAbs terapêuticos.

Ensaios de ligação do receptor Fc-Gamma

Os receptores Fc gama (FcγRs) são membros da superfamília IgG com afinidade para a região Fc de IgGs. Eles são expressos na superfície das células imunes efetoras, onde desempenham um papel fundamental no início das funções efetoras de Fc (por exemplo, ADCC). As três classes diferentes de FcγR têm afinidade diferente para IgGs, com ligação afetada por polimorfismos genéticos e padrões de glicosilação de Fc. Durante o desenvolvimento da terapêutica baseada em anticorpos, a interação da região Fc com FcgRs deve ser caracterizada para determinar o potencial para a função efetora.

Desenvolvimento de ensaio de ligação para anticorpos personalizados

A Sartorius realiza ensaios de ligação FcγR para vários isotipos de anticorpos IgG ou proteínas de fusão Fc usando SPR. Otimizamos o desempenho dos ensaios de ligação FcγR em colaboração com nossos clientes para seu anticorpo terapêutico específico. Para atender a todas as necessidades de ensaio, oferecemos uma variedade de diferentes formatos de ensaio de ligação:

  • FcγR1 / CD64
  • Variante FcγR2a / CD32a R
  • Variante FcγR2a / CD32a H
  • FcγR2b / CD32b
  • Variante FcγR3a / CD16a V
  • Variante FcγR3a / CD16a F
  • FcγR3b / CD16b

Todos os ensaios foram qualificados com uma variedade de mAbs disponíveis comercialmente.

Ensaios de ligação FcRn

Um fator chave na eficácia dos anticorpos terapêuticos é sua meia-vida sérica. Otimizar e rastrear a interação entre FcRn e IgG ao longo do desenvolvimento de anticorpos é de importância crítica.

Serviços Analíticos Flexíveis

Para rastrear a ligação FcRn-IgG, a Sartorius desenvolveu e qualificou ensaios de ligação FcRn prontos para uso em uma variedade de orientações e valores de pH usando SPR como uma leitura.

Também oferecemos vinculação às espécies de toxicologia mais comuns de FcRn para auxiliar na tomada de decisão e interpretação de seu estudo de toxicologia. A ligação de FcRn de macaco Cynomolgus, rato e camundongo a IgGs humanos ou proteínas de fusão pode ser demonstrada e comparada com a ligação a FcRn humano.

Consulte nossos especialistas

A ressonância de plasma de superfície (SPR) é uma leitura preferida para estabelecer a cinética de ligação devido à sua sensibilidade superior, requisitos de volume de amostra mínimo e capacidade de medir a ligação em tempo real. A SPR é freqüentemente o método de escolha para os ensaios de ligação usados ​​durante o desenvolvimento de drogas de anticorpos.

Ensaios personalizados para anticorpos monoclonais personalizados

A Sartorius tem profundo conhecimento no desenvolvimento e otimização de ensaios baseados em SPR de vários formatos. Trabalhamos em estreita colaboração com nossos clientes para desenvolver ensaios personalizados para todos os estágios do processo de desenvolvimento de medicamentos, desde a triagem até a liberação do lote, fornecendo dados urgentes e econômicos sobre:

  • A força da interação para determinar a afinidade da molécula para os parceiros de ligação
  • A taxa de interação para definir a cinética de associação e dissociação
  • A quantidade de material ativo por meio de medições quantitativas dos níveis de moléculas capazes de se ligar
  • A especificidade da molécula por meio da identificação de parceiros de ligação secundária e avaliação da reatividade cruzada

Os ensaios SPR são desenvolvidos em instalações de última geração com certificação cGMP.

Consulte nossos especialistas

O Enzyme-Linked Immunoabsorbent Assay (ELISA) é uma técnica biomolecular robusta, sensível, mas altamente versátil, usada para detectar e quantificar moléculas. Como tal, o ELISA é usado em vários estágios ao longo do desenvolvimento do medicamento.

Desenvolvimento de ensaios ELISA personalizados

A Sartorius desenvolve ensaios ELISA personalizados em estreita colaboração com nossos clientes para atender às especificações de seus ensaios. Oferecemos o desenvolvimento dos seguintes formatos de ELISA:

  • ELISA direto
  • ELIS indireto
  • ELISA sanduíche
  • ELISA Competitivo

Consulte nossos especialistas

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Para antígenos que são difíceis de expressar de forma solúvel, os ensaios de ligação baseados em células permitem a medição da interação de ligação ao antígeno nativo. E porque os ensaios de ligação são um componente chave da caracterização da molécula, particularmente para terapias baseadas em anticorpos, a Sartorius desenvolveu uma variedade de metodologias para avaliar a ligação baseada em células usando diferentes tecnologias, incluindo:

  • Citometria de fluxo com iQue Screener PLUS
  • Recursos de descoberta de meso escala (MSD)

Suporte ao desenvolvimento de ensaio baseado em células

Nossa equipe científica especializada pode trabalhar com você para desenvolver um ensaio para avaliar a ligação ao seu alvo de escolha usando qualquer uma das tecnologias. Também podemos oferecer suporte a ensaios no MSD que podem ser validados para GMP para uso na liberação do lote. E nossa gama de ensaios usa uma variedade de linhas celulares para avaliar a ligação a alvos comuns, como CD20, HER2, tmTNFa, bem como métodos para avaliar o fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) associado às células.

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