Ensayos basados en células

El desarrollo de terapias basadas en proteínas requiere un análisis integral del producto. La caracterización completa requiere el uso de métodos distintos y complementarios, incluidos el análisis estructural y fisicoquímico, los ensayos de unión y los bioensayos basados en células.

Sartorius ha desarrollado una gama de plataformas para analizar la función de terapias basadas en proteínas. Ofrecemos ensayos basados en células listos para usar y personalizables, lo que le permite ahorrar tiempo y al mismo tiempo caracterizar completamente la actividad biológica y la potencia de su molécula. Nuestras plataformas miden las funciones efectoras de su molécula, la inducción o inhibición de actividades secundarias y terciarias (incluidas las interacciones inmunitarias) y la internalización de anticuerpos.

Nuestros bioensayos listos para usar son totalmente compatibles con GCP, GLP y GMP, y brindan servicios de prueba rentables que aceleran el desarrollo biofarmacéutico.

Experiencia en encuadernación FC

Nuestra cartera de bioensayos incluye citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC) con múltiples tipos de efectores, fagocitosis celular dependiente de anticuerpos (ADCP) y citotoxicidad dependiente del complemento (CDC). Evaluar la capacidad de su biológico para activar estas vías es un paso crítico en el desarrollo y caracterización de anticuerpos terapéuticos.

We also offer a range of Fc receptor binding assays to complement our Fc function analysis platforms

Ensayos y plataformas listos para usar

Para las moléculas estándar, nuestros ensayos listos para ejecutar ahorran el tiempo y los gastos de comenzar desde cero, lo que acelera su caracterización y desarrollo.

Para ensayos más complejos, nuestras plataformas pueden proporcionar un trampolín para el desarrollo analítico.

Liberación de lote

La capacidad completa de cGMP en nuestros sitios globales, junto con nuestra experiencia en el desarrollo de ensayos sólidos, nos permite mover sus ensayos seleccionados de la caracterización a la calificación y validación de liberación de lotes con facilidad

Caracterización de fuente única

Sartorius ofrece un conjunto completo de ensayos para caracterizar fármacos de anticuerpos a lo largo de todo el proceso de desarrollo. Esto permite vincular las propiedades estructurales y fisicoquímicas de una proteína con su función biológica, facilitando la toma de decisiones.

Bioensayo basado en célulasCaracterización de la función Fc

Ensayos de potencia personalizados

Total PBMC ADCC

Ensayos de células inmunes

Lymphoid-enriched ADCC

Ensayos ADCC 

NK cell ADCC

Ensayo del reportero ADCCEnsayo del reportero ADCC

ADCP

CDC

Los ensayos de potencia son una medida cuantitativa de la actividad biológica y un componente crítico del desarrollo de fármacos. Apoyan los estudios de estabilidad y las aplicaciones de liberación de lotes durante todo el proceso de desarrollo, desde el descubrimiento hasta la fabricación y comercialización clínicas.

Los ensayos de potencia son una medida cuantitativa de la actividad biológica y un componente crítico del desarrollo de fármacos. Apoyan los estudios de estabilidad y las aplicaciones de liberación de lotes durante todo el proceso de desarrollo, desde el descubrimiento hasta la fabricación y comercialización clínicas.

Servicios bioanalíticos preparados para la normativa

Sartorius ofrece servicios de desarrollo para ensayos de potencia estándar y personalizados. Los ensayos listos para usar se pueden optimizar para satisfacer las necesidades de un desarrollador de fármacos, o los ensayos se pueden diseñar y desarrollar a medida para obtener resultados optimizados. Los ensayos completamente calificados o validados se pueden transferir a nuestros clientes para realizar pruebas y monitoreos de rutina.

Nuestros ensayos de potencia están diseñados y realizados de acuerdo con todos los requisitos reglamentarios aplicables, incluidos USP1033, Farmacopea Europea e ICH Q2B.

También ofrecemos el desarrollo de ensayos para respaldar estudios de comparabilidad y realizar evaluaciones de cambios en el proceso, que incluyen:

  • Desarrollo de ensayos personalizados para medir la neutralización
  • Ensayos de proliferación celular y muerte celular (apoptosis)
  • Ensayos de liberación de citoquinas
  • Ensayos que miden la modulación de la señalización celular (eventos de fosforilación)
  • Ensayos que miden la modulación de la respuesta inflamatoria (función / reclutamiento de células inmunes)
  • Ensayos de activación y unión de receptores
  • Ensayos de unión de ligandos
  • Ensayos de flujo de calcio

La inmuno-oncología se ha convertido en uno de los tratamientos más prometedores para el cáncer. Para respaldar el creciente número de empresas que desarrollan fármacos inmuno-oncológicos, Sartorius ha desarrollado un conjunto de ensayos que nos permiten caracterizar las interacciones de las células inmunes durante el proceso de desarrollo. Realizamos los siguientes ensayos como servicios:

  • Activación
  • Proliferación
  • Producción de citocinas
  • Regulación / supresión
  • Muerte celular / apoptosis
  • ADCC
  • ACDP

Sartorius emplea iQue Screener PLUS para reducir el tiempo y la cantidad de muestra necesaria al obtener múltiples lecturas fenotípicas y funcionales en un solo ensayo. Nuestro equipo de expertos trabaja para optimizar su proceso e interpretar con precisión los datos críticos. También diseñamos y desarrollamos ensayos personalizados para satisfacer las necesidades específicas de cada biofabricante.

La citotoxicidad mediada por células dependiente de anticuerpos (ADCC) es un mecanismo de acción importante de los anticuerpos terapéuticos, especialmente en oncología. La determinación de la actividad ADCC es, por tanto, un paso crítico en el desarrollo de fármacos de anticuerpos, para caracterizarlos como modo de acción primario o secundario, o en el caso de algunas terapias para demostrar su ausencia.

Soluciones de ensayo biológico personalizables

Sartorius ha desarrollado una gama de robustas plataformas de análisis ADCC que abordan los conocidos problemas de variabilidad de estos análisis mediante el uso de formatos basados ​​en placa o iQue Screener PLUS. Dependiendo de las necesidades y requisitos del desarrollador del fármaco, los ensayos ADCC de Sartorius se pueden realizar utilizando células mononucleares de sangre periférica (PBMC), que se recolectan el día del ensayo de una variedad de donantes genotipados. Nuestra cartera de ensayos ADCC también incluye ensayos ADCC sustitutos que utilizan líneas celulares diseñadas que expresan de manera estable el receptor FcγRIIIa para anular la variabilidad específica del donante y proporcionar soluciones viables para la validación de estos ensayos complejos.

Usando nuestra metodología de plataforma, podemos desarrollar un ensayo ADCC para cumplir con sus requisitos. El ADCC personalizado junto con nuestros ensayos calificados de ADCC para objetivos comunes se pueden adaptar para abordar sus necesidades cambiantes a lo largo del proceso de desarrollo con una gama de efectores:

  • PBMC totales
  • PBMC enriquecidas con linfoides
  • Células asesinas naturales (NK)
  • Células informadoras de Promega ADCC
  • Células efectoras KILR CD16

También está disponible una variedad de ensayos de unión al receptor de Fc y análisis de glucanos en profundidad para complementar la ADCC funcional.

La fagocitosis celular dependiente de anticuerpos (ADCP) es un mecanismo inmune a través del cual las células diana unidas a anticuerpos que expresan antígenos tumorales o derivados de patógenos en su superficie activan FcγRs (predominantemente FcγRIIa) en la superficie de monocitos y macrófagos para inducir la fagocitosis. El ADCP da como resultado la internalización y degradación de la célula diana a través de la acidificación del fagosoma y, con eso, la eliminación del cuerpo.

Soluciones de ensayo ADCP robustas y personalizables

En Sartorius, ofrecemos ADCP utilizando el screener plus iQue. Este método mide la fagocitosis mediada por la activación de FcgRI, IIa y IIIa utilizando PBMC con el potencial de multiplexar datos.

Podemos personalizar aún más las lecturas simultáneas de ADCC para recopilar información sobre otras poblaciones de células y citocinas para investigar completamente la respuesta funcional de su anticuerpo.

También está disponible un bioensayo informador basado en placa para medir el ADCP, lo que permite el potencial de validación.

La citotoxicidad dependiente del complemento (CDC) es una función efectora bien caracterizada de los anticuerpos IgG e IgM. El CDC se inicia mediante la unión de la proteína del complemento C1q al dominio Fc de los mAb, lo que desencadena una cascada proteolítica y da como resultado la formación del complejo de ataque a la membrana y la posterior muerte de la célula diana mediante lisis.

La capacidad de un anticuerpo terapéutico para activar el complemento y realizar CDC debe evaluarse durante la caracterización del producto.

Plataforma robusta para medir CDC

Sartorius ofrece una plataforma sólida que permite a los desarrolladores calificar y medir la actividad de los CDC para una variedad de objetivos. Hemos desarrollado soluciones listas para usar que están listas para usar y también ofrecemos un desarrollo totalmente personalizado para nuevos objetivos. Tanto el complemento humano como el de conejo pueden obtenerse para el desarrollo y las pruebas de ensayos de los CDC.

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Para los antígenos que son difíciles de expresar de forma soluble, los ensayos de unión basados en células permiten medir la interacción de unión con el antígeno nativo. Y dado que los ensayos de unión son un componente clave de la caracterización de moléculas, en particular para las terapias basadas en anticuerpos, Sartorius ha desarrollado una variedad de metodologías para evaluar la unión basada en células utilizando diferentes tecnologías, que incluyen:

  • Citometría de flujo con iQue Screener PLUS
  • Recursos de Meso Scale Discovery (MSD)

Apoyo al desarrollo de ensayos basados en células

Nuestro equipo científico experto puede trabajar con usted para desarrollar un ensayo para evaluar la unión a su objetivo de elección utilizando cualquiera de las tecnologías. También podemos respaldar ensayos en el MSD que se pueden validar a GMP para su uso en la liberación de lotes. Y nuestra gama de ensayos utiliza una variedad de líneas celulares para evaluar la unión a objetivos comunes, como CD20, HER2, tmTNFa, así como métodos para evaluar el factor de crecimiento endotelial vascular asociado a células (VEGF).

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