Cromatografia de Troca Iônica

Cromatografia de Troca Iônica (IEX) é a técnica usada para separar moléculas com base em sua carga elétrica. Moléculas carregadas positivamente se ligam a um trocador de cátions (CEX) e moléculas carregadas negativamente se ligam a um trocador de ânions (AEX).

A aplicação mais comum para o IEX é o polimento da molécula alvo, mas também pode ser usado para capturar o produto, como vetores virais.

Encontre a solução certa para o seu processo de cromatografia

As resinas de troca iônica são aplicadas para a remoção de impurezas e exibem boas capacidades de ligação para proteínas pequenas e médias. Além disso, o trocador de ânions Hypercel Star AX tolerante a sal oferece uma integração simples do processo sem a necessidade de manipulação do fluxo de alimentação.


Atributos

Ceramic HyperD Q

Ceramic HyperD DEAE

Ceramic HyperD CM

Hypercel Star AX 

Diâmetro da partícula

50 µm 50 µm 50 µm 80 µm 
Capacidade dinâmica de ligação (10% BT)  

> 85 mg/mL BSA 

> 85 mg/mL BSA 

> 60 mg/mL IgG > 100 mg/mL BSA 

Funcionalidade

Forte troca de ânions  Fraca troca de ânionsFraca troca de cátions Troca de ânions fraca (tolerante a sal)

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Membranas de troca iônica também são usadas para polir mAbs. Comparado às resinas, taxas de fluxo mais altas podem ser aplicadas às membranas, resultando em menor tempo de processo e maior produtividade. Além disso, as membranas têm uma maior capacidade de ligação ao vírus, partículas semelhantes a vírus e outros complexos grandes em comparação com as resinas. Portanto, eles são amplamente utilizados na captura dessas moléculas. Nossas membranas são fornecidas como dispositivos prontos para uso.


Atributos

Sartobind® Q Sartobind® STIC Sartobind® S 
Tamanho do poro3-5 µm 3-5 µm 3-5 µm 
FuncionalidadeForte troca de ânionsFraca troca de ânions (tolerante a sal)Forte troca de cátions

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Resinas IEX

Ceramic HyperD Q

Ceramic HyperD Q é um trocador de ânions forte que é adequado para a remoção de impurezas aniônicas (isto é, proteína da célula hospedeira e DNA). Seu grânulo de base de 50 µm oferece alta resolução para aplicações de polimento quando necessário.

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Introdução

Os sorventes para cromatografia de troca iônica Q, DEAE e CM Ceramic HyperD™ F são projetados usando o design proprietário 'gel-in-a-shell' que fornece rápida transferência de massa e ligação eficaz. Baseia-se em um hidrogel de alta capacidade, polimerizado dentro dos gigapores de um cordão de cerâmica rígido.

Características e benefícios

  • Alta capacidade de encadernação dinâmica a altas taxas de fluxo
  • Sorvente verdadeiramente rígido e não compressível
  • O absorvente CM Ceramic HyperD F tolerante ao sal reduz os requisitos de Ultrafiltração / Diafiltração (UF / DF)
  • Proteínas recombinantes
  • Purificação de plasmídeo
  • Purificação de enzimas, proteínas plasmáticas
  • Vacinas
  • Captura direta de anticorpos monoclonais (CM Ceramic HyperD ™ F)
  • IgM

Item

Adsorvente Q

Adsorvente
DEAE

Adsorvente CM

Tamanho médio de partícula (µm)

50

50

50

Capacidade dinâmica de ligação (mg / mL) 10% de avanço a 200 cm / h BSA*
> 85¹
BSA*
> 85¹
IgG
> 602

Quantidade de grupos iônicos (µEq/mL)

> 250

> 200

250 - 400

pH de trabalho

2 -12

pH de limpeza

1 - 14 
Resistência à pressão

70 barg (1,000 psi)

Mudanças de volume devido ao pH e força iônica Não compressível


* BSA = Albumina Sérica Bovina
¹ 5 mg/mL BSA em 50 mM Tris-HCl, pH 8.6
25 mg/mL hu IgG em 50 mM de acetato de sódio, 100 mM NaCl, pH 4.7

Sorventes de cerâmica HyperD F

Q Sorbent

DEAE Sorbent

CM Sorbent

Tamanho da embalagemNúmero da peça

25 mL 

20066-031

20067-039

20050-035

100 mL

20066-023

20067-021

20050-027

1 L

20066-015

20067-013

20050-019

5 L

20066-064

20067-054

20050-050

10 L

20066-056

20067-047

20050-043

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Colunas de cromatografia pré-embaladas HyperD F de cerâmica para troca iônica
PRC Prepacked Columns
DescriçãoNúmero da peça

Q Ceramic HyperD F 5x50, 1 mL, 1/pkg

PRC05X050QCHDF01

CM Ceramic HyperD F 5x50, 1 mL, 1/pkg

PRC05X050CMCHDF

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Q, S, DEAE, CM Ceramic HyperD® F - Ion Exchange Resins

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Ceramic HyperD DEAE

O Ceramic HyperD DEAE é um trocador de ânions fraco para a purificação de polimento. Alterações na condutividade e no pH podem otimizar as etapas de purificação utilizando a alteração de carga nas proteínas e ligantes.

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Introdução

Os sorventes para cromatografia de troca iônica Q, DEAE e CM Ceramic HyperD™ F  foram projetados usando o design proprietário 'gel-in-a-shell' que fornece rápida transferência de massa e ligação eficaz. Baseia-se em um hidrogel de alta capacidade, polimerizado dentro dos gigapores de um grânulo de cerâmica rígido.


Características e benefícios

  • Alta capacidade de ligação dinâmica a altas taxas de fluxo
  • Sorvente verdadeiramente rígido e não compressível
  • O absorvente CM Ceramic HyperD F tolerante ao sal reduz os requisitos de Ultrafiltração / Diafiltração (UF / DF)
  • Proteínas recombinantes
  • Purificação de plasmídeo
  • Purificação de enzimas, proteínas plasmáticas
  • Vacinas
  • Captura direta de anticorpos monoclonais (CM Ceramic HyperD ™ F)
  • IgM

Item

Adsorvente Q

Adsorvente DEAE

Adsorvente CM

Tamanho médio de partícula (µm)

50

50

50

Capacidade dinâmica de ligação (mg / mL) 10% de avanço a 200 cm/h BSA*
> 85¹
BSA*
> 85¹
IgG
> 602
Quantidade de grupos iônicos (µEq / mL)

> 250

> 200

250 - 400

pH de trabalho

2 -12

pH de limpeza

1 - 14 
Resistência à pressão

70 barg (1,000 psi)

Mudanças de volume devido ao pH e força iônica Não compressível


* BSA = Albumina Sérica Bovina
¹ 5 mg/mL BSA em 50 mM Tris-HCl, pH 8.6
25 mg/mL hu IgG em 50 mM  de acetato de sódio, 100 mM NaCl, pH 4.7

Sorventes de cerâmica HyperD F

Q Sorbent

DEAE Sorbent

CM Sorbent

Tamanho da embalagemNúmero da peça

25 mL 

20066-031

20067-039

20050-035

100 mL

20066-023

20067-021

20050-027

1 L

20066-015

20067-013

20050-019

5 L

20066-064

20067-054

20050-050

10 L

20066-056

20067-047

20050-043

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Colunas de cromatografia pré-embaladas HyperD F de cerâmica para troca iônica
Colunas Pré-embaladas PRC
DescriçãoNúmero da peça

Q Ceramic HyperD F 5x50, 1 mL, 1/pkg

PRC05X050QCHDF01

CM Ceramic HyperD F 5x50, 1 mL, 1/pkg

PRC05X050CMCHDF01

Colunas pré-embaladas AcroSep
DescriçãoNúmero da peça

Q Ceramic HyperD F, 1 mL, Red, 5/pkg

20066-C001

CM Ceramic HyperD F, 1 mL, Green, 5/pkg

20050-C001

DEAE Ceramic HyperD F, 1 mL, Orange, 5/pkg

20067-C001

(1) each: Q, CM, and DEAE Ceramic HyperD F, 1 mL, 4/pkg

IEXVP-C001

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Q, S, DEAE, CM Ceramic HyperD® F - Ion Exchange Resins

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Ceramic HyperD CM

O Ceramic HyperD CM é um trocador de cátions fraco para aplicações de polimento. Alterações na condutividade e no pH podem otimizar as etapas de purificação utilizando a alteração de carga nas proteínas e ligantes.

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Introdução

Os sorventes de cromatografia de troca iônica HyperD F Q, DEAE e CM Ceramic são projetados usando o design proprietário 'gel-in-a-shell' que fornece transferência rápida de massa e ligação eficaz. Baseia-se em um hidrogel de alta capacidade, polimerizado dentro dos gigapores de um grânulo de cerâmica rígido.

Características e benefícios

  • Alta capacidade de encadernação dinâmica a altas taxas de fluxo
  • Sorvente verdadeiramente rígido e não compressível
  • O absorvente CM Ceramic HyperD ™ F tolerante ao sal reduz os requisitos de Ultrafiltração / Diafiltração (UF / DF)
  • Proteínas recombinantes
  • Purificação de plasmídeo
  • Purificação de enzimas, proteínas plasmáticas
  • Vacinas
  • Captura direta de anticorpos monoclonais (CM Ceramic HyperD ™ F)
  • IgM

Item

Adsorvente Q

Adsorvente DEAE

Adsorvente CM

Tamanho médio de partícula (µm)

50

50

50

Capacidade dinâmica de ligação (mg / mL) 10% de avanço a 200 cm/hBSA*
> 85¹
BSA*
> 85¹
IgG
> 602

Quantidade de grupos iônicos (µEq/mL)

> 250

> 200

250 - 400

pH de trabalho

2 -12

pH de limpeza

1 - 14 
Resistência à pressão

70 barg (1,000 psi)

Mudanças de volume devido ao pH e força iônica Não compressível


* BSA = Albumina Sérica Bovina
¹ 5 mg/mL BSA em 50 mM Tris-HCl, pH 8.6
25 mg/mL hu IgG em 50 mM de acetato de sódio, 100 mM NaCl, pH 4.7

Ceramic HyperD F Sorbents

Q Sorbent

DEAE Sorbent

CM Sorbent

Tamanho da embalagemNúmero da peça

25 mL 

20066-031

20067-039

20050-035

100 mL

20066-023

20067-021

20050-027

1 L

20066-015

20067-013

20050-019

5 L

20066-064

20067-054

20050-050

10 L

20066-056

20067-047

20050-043

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Colunas de cromatografia pré-embaladas HyperD F de cerâmica para troca iônica
Colunas Pré-embaladas PRC
DescriçãoNúmero da peça

Q Ceramic HyperD F 5x50, 1 mL, 1/pkg

PRC05X050QCHDF01

CM Ceramic HyperD F 5x50, 1 mL, 1/pkg

PRC05X050CMCHDF01

AcroSep Prepacked Columns

Q Ceramic HyperD F, 1 mL, Red, 5/pkg

20066-C001

CM Ceramic HyperD F, 1 mL, Green, 5/pkg

20050-C001

DEAE Ceramic HyperD F, 1 mL, Orange, 5/pkg

20067-C001

(1) each: Q, CM, and DEAE Ceramic HyperD F, 1 mL, 4/pkg

IEXVP-C001

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Q, S, DEAE, CM Ceramic HyperD® F - Ion Exchange Resins

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Hypercel Star AX

O Hypercel Star AX é um trocador de ânions tolerante a sal com uma amina primária como grupo funcional. Ele pode ser facilmente integrado a um fluxo de trabalho de purificação sem manipulação do fluxo de alimentação.

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Adsorbente avançado da cromatografia da troca do ânion da recuperação tolerante a sal

O HyperCel STAR AX é um adsorbente de cromatografia de troca aniônica escalonável projetado para captura de proteínas de alta produtividade com condutividade moderada ou mais alta do sal (2 a 15 mS / cm), típica de matérias-primas biológicas não diluídas (por exemplo, sobrenadantes da cultura de células de mamíferos, E. coli matéria-prima, plasma, outros ...).

As aplicações incluem captura direta de proteínas recombinantes, anticorpos monoclonais e policlonais, derivados de plasma ou outros produtos farmacêuticos.

Devido à sua capacidade de capturar diretamente proteínas de fluxos de alimentação não diluídos, o adsorbente HyperCel STAR AX também pode ser usado para remoção precoce de contaminantes (ou seja, proteínas da célula hospedeira CHO), antes da purificação do alvo, ou seja, antes da captura do MAb por uma etapa de afinidade da proteína A.

O sorvente HyperCel STAR AX é fabricado em larga escala e atende às necessidades de usuários industriais e autoridades reguladoras. Este sorvente oferece:

  • Alta capacidade de encadernação dinâmica (DBC) em um curto período de residência (2 minutos ou menos)
  • Captura direta de proteína de matéria-prima não diluída com condutividade moderada ou alta
  • Excelentes propriedades de vazão para processamento rápido de matéria-prima
  • Seletividade distinta, consistente em uma ampla faixa de condutividade (2 - 15 mS / cm)
  • Economia de processo aprimorada

Aplicação 1. Captura direta de albumina a partir de plasma não diluído

O objetivo é avaliar a resina HyperCel STAR AX como o primeiro passo em uma sequência de purificação em duas etapas para capturar albumina sérica humana (HSA) de plasma não diluído (condutividade 11 mS / cm). A resina HyperCel STAR AX foi usada como primeira etapa de captura, seguida por uma etapa de troca catiônica ortogonal realizada na resina S HyperCel, sem ajuste de pH ou condutividade do plasma. O plasma não diluído puro (pH 7,6, 11mS / cm) foi carregado com DBC de 30 mg / mL.

O Projeto de Experimentos (DoE) em placas de filtro de 96 poços foi realizado para determinar as condições ideais para alcançar a melhor relação rendimento / pureza.

Estas condições foram então transferidas para cromatografia em coluna em colunas pré-embaladas da RPC.

As condições determinadas em placas de 96 poços foram aplicadas à cromatografia de plasma não diluído em resina HyperCel STAR AX em uma coluna pré-embalada de 1 mL de PRC. As análises de cromatograma e SDS-PAGE das frações confirmaram que a maioria dos contaminantes foi eliminada por lavagem de alta condutividade, levando a uma fração de HSA 99% pura em uma única etapa, com rendimento de 90%.

Além disso, a resina HyperCel STAR AX usada na etapa de captura com plasma não diluído apresentava um DBC> 30 mg / mL, mais de 2 vezes maior que o de uma resina convencional de agarose DEAE testada nessas condições.

A HSA foi eluída por uma simples diminuição de pH (4,0), sem adição de sal, permitindo uma carga direta em uma coluna de troca catiônica ortogonal (resina S HyperCel).

Esta última etapa de polimento na resina S HyperCel levou a uma fração purificada de HSA eluída em pH 7,0 com pureza> 99% e capacidade em torno de 65 mg / mL.

Carregamento

Capacidade (mg/mL)

Produção

Pureza

Caputa com resina HyperCel STAR AX

Plasma não diluído

> 30 mg/mL

90%

99%

Polimento com a S HyperCel

Eluato de pH 4,0 da resina HyperCel STAR AX

65 mg/mL

95%

99%


Aplicação 2. Remoção precoce de CHOPs antes da captura da proteína A de um anticorpo monoclonal (MAb)

O objetivo deste estudo foi avaliar o impacto de uma etapa de pré-purificação usando a resina HyperCel STAR AX antes da captura convencional de resina de proteína A de um anticorpo monoclonal (MAb) da matéria-prima da cultura de células de mamíferos.

O conteúdo de CHOPs contaminantes (proteínas de ovário de hamster chinês) foi comparado usando um ensaio comercial ELISA para os dois esquemas de purificação.

Os dados mostram que o uso da resina HyperCel STAR AX antes da proteína A resulta em uma melhor redução de CHOP (> 8 vezes). Devido a esse efeito sinérgico, a partir de um conteúdo inicial de proteína de célula hospedeira (HCP) de 413.000 ppm, o nível final de CHOP é reduzido para ~ 400 ppm (redução de 3 log), com uma recuperação de MAb de 90%.

Uma etapa de pré-purificação pode impactar positivamente a economia do processo, prolongando a vida útil de uma coluna de proteína A dispendiosa usada como etapa padrão para a captura de MAb.

O adsorvente HyperCel STAR AX é composto por uma matriz rígida de celulose que possui excelentes propriedades de fluxo e gera baixa contrapressão, compatível com as necessidades da produção de proteínas em escala de fabricação. O adsorvente está disponível em uma variedade de configurações de embalagem, bem como nas convenientes colunas pré-embaladas PRC de 1 e 5 mL, projetadas para otimização rápida de métodos, triagem de seletividade ou pequenos trabalhos preparatórios. O sorvente HyperCel STAR AX é fornecido como uma pasta / suspensão em NaCl 1 M contendo 20% (v / v) de etanol ou como um bolo úmido para aplicações em escala de processo (o sorvente úmido do bolo facilita a transferência do sorvente, evitando a agitação e suspensão de grandes volumes de material).

O adsorvente HyperCel STAR AX possui uma estabilidade química que garante limpeza simples no local (CIP) e armazenamento. Para CIP padrão, recomenda-se o tratamento de NaOH 0,5 a 1 M, enquanto é possível o armazenamento a longo prazo em NaOH 10 a 100 mM.


Principais propriedades

Tamanho médio de partícula

80 µm

Ligante de troca iônica Amina primária

Capacidade de ligação dinâmica 1

>100 mg BSA/mL com range de pH 7.5 – 8.0 e condutividade 15 mS/cm

Faixa de operação típica de condutividade da matéria-prima

2 – 15 mS/cm

Condições de limpeza recomendadas 2

1 M NaOH

     

1 Determinado usando um BSA de 5 mg / mL em Tris-HCl 25 mM, NaCl 0,14 M em tempo de residência de 2 minutos.
2 Injeção de 5 volumes de coluna (CV) de 0,5 - 1 M NaOH, 1 hora de tempo de contato.

Resina HyperCel STAR AX

TamanhoNúmero da peça

25 mL

20197-026

100 mL

20197-032

1 L

20197-046

5 L

20197-058

10 L

20197-064

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Colunas pré-embaladas HyperCel STAR AX PRC

DescriçãoNúmero da peça

PRC Column 5x50 HyperCel STAR AX, 1 mL

PRCSTARAX1ML

PRC Column 8x100 HyperCel STAR AX, 5 mL

PRCSTARAX5ML

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DescriçãoNúmero da peça

AcroPrep ScreenExpert Plates filled with HyperCel STAR AX Sorbent

96WPSTARAX50

ScreenExpert RoboColumn HyperCel STAR AX 200 μL, row of 8

SR2STARAX

96-well RoboColumn array plate

SR96WAP

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HyperCel STAR AX Ion Exchange Resin Salt Tolerant Advanced Recovery Anion Exchange Chromatography Resin

PDF | 649.7 KB
Membranas IEX

Sartobind® Q

O Sartobind® Q é um forte trocador de ânions básico com amônio quaternário como ligante. Essa membrana é fornecida em dispositivos prontos para uso com duas alturas de leito diferentes.

Veja detalhes do produto

Sartobind® STIC

O Sartobind® STIC PA é um trocador de ânions básico fraco e tolerante ao sal. O ligante é uma amina primária. Devido à sua tolerância ao sal, trabalha eficientemente com maior condutividade. Essa membrana é fornecida em dispositivos prontos para uso na altura padrão da cama.

Veja detalhes do produto

Sartobind® S

O Sartobind® S é um forte trocador de cátions ácidos com um ácido sulfônico como ligante. Essa membrana é fornecida em dispositivos prontos para uso com duas alturas de leito diferentes.

Veja detalhes do produto

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